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凱氏帶染色

日期:2025-11-07 返回


以下是一些常見的凱氏帶染色方法:


鹽酸小檗堿 - 苯胺藍染色法

實驗材料:植物根組織切片、二甲苯、無水乙醇、75% 酒精、0.1% 鹽酸小檗堿染色液、0.05% 苯胺藍染色液、抗熒光淬滅封片液等。

實驗步驟

脫蠟與水化:依次將切片放入二甲苯 Ⅰ20 分鐘、二甲苯 Ⅱ20 分鐘進行脫蠟,然后放入無水乙醇 Ⅰ5 分鐘、無水乙醇 Ⅱ5 分鐘,最后用 75% 酒精處理 5 分鐘,再用自來水沖洗。

染色:將切片放入 0.1% 鹽酸小檗堿染色液中避光染色 1 小時,水洗 3-5 次,吸干水分后,將切片置于 0.05% 苯胺藍染色液中避光染色 30 分鐘,再次水洗 3-5 次,吸干水分。

封片:滴加抗熒光淬滅封片液封片,蓋上蓋玻片。

觀察與拍照:用熒光顯微鏡(DAPI 濾光片)觀察凱氏帶,由于熒光易淬滅,應盡快拍照,拍照過程中注意避光,切片可短暫保存于 4℃環(huán)境下。

堿性品紅染色法

實驗材料:植物根組織、堿性品紅染液、固定液(如 FAA 固定液)等。

實驗步驟

取材與固定:選取合適的植物根組織,將其取下后用水沖洗干凈,然后放入 FAA 固定液中固定 24 小時以上,較大的組織需要切成小塊再固定。

切片:將固定好的根組織進行切片,厚度根據(jù)需要確定,一般為 10-20 微米。

染色:將切片放入堿性品紅染液中染色一定時間,具體時間根據(jù)材料和染液濃度而定,通常為 1-2 小時。

漂洗:用蒸餾水或清水漂洗切片,去除多余的染液,直到切片顏色不再明顯變化。

觀察:將染色后的切片放在顯微鏡下觀察,凱氏帶會被染成紅色,呈現(xiàn)網(wǎng)格狀結(jié)構,同時維管組織的木質(zhì)部也會被染色。

間苯三酚 - 鹽酸染色法

實驗材料:植物根組織切片、間苯三酚溶液、濃鹽酸等。

實驗步驟

準備切片:將植物根組織切成薄片,可采用徒手切片法或石蠟切片法。

染色:在載玻片上滴加間苯三酚溶液,將切片放入其中浸泡 5-10 分鐘,然后滴加濃鹽酸,立即蓋上蓋玻片。

觀察:在顯微鏡下觀察,凱氏帶中的木質(zhì)素會被染成紅色或紫紅色,與其他部位形成鮮明對比。




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